TransMIT AP-SMALDI質(zhì)譜成像技術(shù)——推動(dòng)環(huán)境化學(xué)發(fā)展的“新力量”
7.29日,“第十一屆環(huán)境化學(xué)大會(huì)”在哈爾濱圓滿落幕,中國工程院院士、哈爾濱工業(yè)大學(xué)教授仁南琪在開幕式上反復(fù)強(qiáng)調(diào)“創(chuàng)新環(huán)境科學(xué),低碳環(huán)保健康”這一主題。此次環(huán)境化學(xué)大會(huì),給予了領(lǐng)域內(nèi)各位專家的學(xué)術(shù)交流的平臺(tái),推進(jìn)了環(huán)境科學(xué)的發(fā)展。
環(huán)境是關(guān)系著人類生存的關(guān)鍵因素。當(dāng)今社會(huì)經(jīng)濟(jì)及工業(yè)的高速發(fā)展導(dǎo)致環(huán)境問題愈發(fā)嚴(yán)峻,因此如何減少環(huán)境污染,高效率地解決現(xiàn)有環(huán)境問題,成為當(dāng)下環(huán)境科學(xué)的熱門話題。目前,質(zhì)譜成像技術(shù)已成功應(yīng)用于生物體中污染物監(jiān)測(cè),且可以對(duì)污染物脅迫的生物(例如:斑馬魚)進(jìn)行脂質(zhì)空間組學(xué)研究,用于研究污染物對(duì)生物生理狀態(tài)的影響。
基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜成像(MALDI MSI)作為一種先進(jìn)的分子成像技術(shù),可以快速、精準(zhǔn)、直觀地展現(xiàn)出生物體內(nèi)各分子的空間分布,獲得分子量、空間位置及空間相對(duì)離子豐度等信息,因此在環(huán)境污染物對(duì)生物體影響的研究中發(fā)揮著越來越重要的作用。下面分享兩篇TransMIT AP-SMALDI質(zhì)譜成像技術(shù)在環(huán)境領(lǐng)域中的應(yīng)用。
斑馬魚及大型溞脂質(zhì)分布變化研究
近年來,由于釋放到環(huán)境中的化學(xué)物質(zhì)數(shù)量和種類不斷增多,海洋及淡水生態(tài)系統(tǒng)的污染程度也越來越嚴(yán)重。其中,親脂性物質(zhì)是特別需要關(guān)注的成分,他們可以通過干擾水生生物的脂質(zhì)組成來影響其生理生化特性。考慮到脂質(zhì)對(duì)生物組織結(jié)構(gòu)及功能至關(guān)重要,那么脂質(zhì)模式的改變通常與病理過程相關(guān)也就不足為奇了。因此了解化學(xué)脅迫如何影響水生生物中脂質(zhì)的組成和空間分布就變得尤為重要。德國拜羅伊特大學(xué)的Andreas Römpp教授實(shí)驗(yàn)室利用常壓基質(zhì)輔助激光解析電離(TransMIT AP-SMALDI 5 AF)技術(shù),針對(duì)斑馬魚和大型溞這兩種環(huán)境科學(xué)與生態(tài)毒理學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用最為廣泛的水生模式生物建立并優(yōu)化樣品制備流程,將兩種生物的脂質(zhì)模式與組織或細(xì)胞的解剖特征相關(guān)聯(lián),為今后研究污染物脅迫下其他生物的脂質(zhì)模式變化提供重要的參考依據(jù)。
圖1 斑馬魚神經(jīng)元和非神經(jīng)元內(nèi)脂質(zhì)分布的MALDI MSI成像。(a,e) 成年斑馬魚矢狀位切片經(jīng)H&E染色顯示了鰓、眼(視網(wǎng)膜、晶狀體)、腦(端腦、中腦蓋、小腦)和肝臟的詳細(xì)結(jié)構(gòu)。(b) PC(O-32:0)[M+H]+(紅色)和PC(30:0)[M+K]+(綠色)的RGB疊加圖像。(c) PC(O-32:0)[M+H]+的離子圖像顯示鰓絲處有高信號(hào)強(qiáng)度(白色箭頭)。(d) PC(30:0)[M+K]+ 的離子圖像顯示眼睛晶狀體和視網(wǎng)膜處的高信號(hào)強(qiáng)度 (白色箭頭)。(f) PC(O-32:0)[M+H]+(紅色)、PC(O-36:1)[M+K]+(藍(lán)色)和PC(40:6)[M+H]+(綠色)的RGB疊加圖像。(g) PC(O-32:0)[M+H]+的離子圖像顯示非神經(jīng)性組織的高強(qiáng)度信號(hào),例如肌肉組織(白色箭頭)。(h) PC(O-36:1)[M+K]+的離子圖像,顯示中腦蓋和部分小腦的結(jié)構(gòu)。(i) PC(40:6)[M+H]+的離子圖像顯示大腦和眼睛以及肝臟(白色箭頭)相對(duì)位置的分布。
玉米中黃曲霉毒素B1及植物防御代謝物空間分布研究
為了應(yīng)對(duì)不利化合物的存在,植物可以生物轉(zhuǎn)化外源物質(zhì)、轉(zhuǎn)移母體化合物及其代謝物,并在細(xì)胞或組織水平上通過區(qū)室化作用對(duì)其進(jìn)行隔離。這種情況同樣適用于真菌毒素,即在植物感染過程中發(fā)揮重要作用的真菌次生代謝產(chǎn)物。為了描述玉米與黃曲霉毒素B1在組織和器官水平上的相互作用效應(yīng),Bernhard Spengler教授團(tuán)隊(duì)利用AP-SMALDI質(zhì)譜成像技術(shù)對(duì)玉米植株的根、莖、葉進(jìn)行原位檢測(cè),并從代謝組學(xué)的角度探討了黃曲霉毒素B1(AFB1)與其潛在修飾形式的生物轉(zhuǎn)化、分布、定位及其對(duì)健康玉米植株的初級(jí)、次級(jí)代謝所產(chǎn)生的后續(xù)影響。
圖2 AFB1處理14天后,對(duì)照樣品和AFB1處理的玉米植株根系切片的AP-SMALDI質(zhì)譜成像。(a)AFB1 [M+K]+,m/z351.0265,在表皮和皮質(zhì)細(xì)胞中積累;(b)矢車菊素葡萄糖苷[M]+,m/z 449.1076;(c)脫鎂葉綠素a [M+H]+,m/z871.5729的空間分布;(d)AFB1處理和對(duì)照玉米根系切片的光學(xué)圖像,主要形態(tài)特征標(biāo)記;(e)RGB疊加圖像,AFB1[M+K]+,m/z351.0265(紅色),脫鎂葉綠素a[M+H]+,m/z871.5729(綠色)和矢車菊素葡萄糖苷[M]+,m/z449.1076(藍(lán)色);(f)RGB圖像與光學(xué)圖像疊加。空間分辨率10μm,295×145 pixels。
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